مطلوبہ استعمال
مضبوط قدم^®PROM ٹیسٹ حمل کے دوران اندام نہانی رطوبتوں میں امینیٹک سیال سے IGFBP-1 کا پتہ لگانے کے لیے ایک ضعف تشریح شدہ، کوالٹیٹیو امیونوکرومیٹوگرافک ٹیسٹ ہے۔اس ٹیسٹ کا مقصد حاملہ خواتین میں جنین کی جھلیوں (ROM) کے پھٹنے کی تشخیص میں مدد کے لیے پیشہ ورانہ استعمال کے لیے ہے۔

تعارف
امینیٹک سیال میں IGFBP-1 (انسولین نما گروتھ فیکٹر بائنڈنگ پروٹین-1) کا ارتکاز زچگی کے سیرم کے مقابلے میں 100 سے 1000 گنا زیادہ ہے۔IGFBP-1 عام طور پر اندام نہانی میں موجود نہیں ہوتا ہے، لیکن جنین کی جھلیوں کے پھٹنے کے بعد، IGFBP-1 کی زیادہ ارتکاز کے ساتھ امینیٹک سیال اندام نہانی کی رطوبتوں کے ساتھ گھل مل جاتا ہے۔StrongStep® PROM ٹیسٹ میں، اندام نہانی کی رطوبت کا ایک نمونہ جراثیم سے پاک پالئیےسٹر سویب کے ساتھ لیا جاتا ہے اور نمونہ کو Specimen Extraction Solution میں نکالا جاتا ہے۔محلول میں IGFBP-1 کی موجودگی کا پتہ تیز ٹیسٹ ڈیوائس کے ذریعے لگایا جاتا ہے۔

اصول
مضبوط قدم^®PROM ٹیسٹ کلر امیونوکرومیٹوگرافک، کیپلیری فلو ٹیکنالوجی کا استعمال کرتا ہے۔ٹیسٹ کے طریقہ کار کے لیے سیمپل بفر میں جھاڑو ملا کر اندام نہانی کے جھاڑو سے IGFBP-1 کو حل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔پھر مخلوط نمونہ بفر کو ٹیسٹ کیسٹ کے نمونے میں اچھی طرح شامل کیا جاتا ہے اور مرکب جھلی کی سطح کے ساتھ منتقل ہوتا ہے۔اگر نمونے میں IGFBP-1 موجود ہے، تو یہ بنیادی اینٹی IGFBP-1 اینٹی باڈی کے ساتھ رنگین ذرات کے ساتھ ایک کمپلیکس بنائے گا۔اس کے بعد کمپلیکس ایک دوسرے اینٹی IGFBP-1 اینٹی باڈی کا پابند ہوگا جو نائٹروسیلوز جھلی پر لیپت ہے۔کنٹرول لائن کے ساتھ ایک مرئی ٹیسٹ لائن کا ظاہر ہونا مثبت نتیجہ کی نشاندہی کرے گا۔

کٹ کے اجزاء

مواد درکار ہے لیکن فراہم نہیں کیا گیا۔

احتیاطی تدابیر
■ صرف پیشہ ورانہ ان وٹرو تشخیصی استعمال کے لیے۔
پیکج پر بتائی گئی میعاد ختم ہونے کی تاریخ کے بعد استعمال نہ کریں۔اگر اس کا فوائل پاؤچ خراب ہو جائے تو ٹیسٹ کا استعمال نہ کریں۔ٹیسٹوں کو دوبارہ استعمال نہ کریں۔
■ اس کٹ میں جانوروں کی مصنوعات شامل ہیں۔جانوروں کی اصلیت اور/یا سینیٹری حالت کا مصدقہ علم منتقلی روگجنک ایجنٹوں کی عدم موجودگی کی مکمل ضمانت نہیں دیتا۔اس لیے، یہ تجویز کی جاتی ہے کہ ان مصنوعات کو ممکنہ طور پر متعدی سمجھا جائے، اور معمول کی حفاظتی احتیاطی تدابیر کا مشاہدہ کرتے ہوئے ہینڈل کیا جائے (کھانا یا سانس نہ لینا)۔
■ حاصل کیے گئے ہر نمونے کے لیے ایک نیا نمونہ جمع کرنے والا کنٹینر استعمال کرتے ہوئے نمونوں کی کراس آلودگی سے بچیں۔
کوئی بھی ٹیسٹ کرنے سے پہلے پورے طریقہ کار کو بغور پڑھیں۔
■ اس علاقے میں نہ کھائیں، نہ پیئیں یا سگریٹ نوشی نہ کریں جہاں نمونے اور کٹس کو سنبھالا جاتا ہے۔تمام نمونوں کو ایسے ہینڈل کریں جیسے ان میں متعدی ایجنٹ ہوں۔پورے طریقہ کار کے دوران مائکرو بائیولوجیکل خطرات کے خلاف قائم کردہ احتیاطی تدابیر کا مشاہدہ کریں اور نمونوں کو مناسب طریقے سے ضائع کرنے کے لیے معیاری طریقہ کار پر عمل کریں۔حفاظتی لباس پہنیں جیسے لیبارٹری کوٹ، ڈسپوزایبل دستانے اور آنکھوں کی حفاظت جب نمونوں کی جانچ کی جائے۔
■ مختلف لاٹوں سے ری ایجنٹس کا تبادلہ یا اختلاط نہ کریں۔حل کی بوتل کے ڈھکنوں کو نہ ملائیں۔
نمی اور درجہ حرارت نتائج کو بری طرح متاثر کر سکتے ہیں۔
پرکھ کا طریقہ کار مکمل ہونے پر، جھاڑو کو کم از کم 20 منٹ کے لیے 121 ° C پر آٹوکلیونگ کرنے کے بعد احتیاط سے ٹھکانے لگائیں۔متبادل طور پر، ان کا علاج 0.5% سوڈیم ہائپوکلورائیڈ (یا گھریلو بلیچ) سے ایک گھنٹہ پہلے تک کیا جا سکتا ہے۔استعمال شدہ جانچ کے مواد کو مقامی، ریاستی اور/یا وفاقی ضوابط کے مطابق ضائع کیا جانا چاہیے۔
■ حاملہ مریضوں کے ساتھ سائٹولوجی برش استعمال نہ کریں۔

ذخیرہ اور استحکام
■ کٹ کو 2-30°C پر اس وقت تک ذخیرہ کیا جانا چاہیے جب تک کہ مہر بند پاؤچ پر ختم ہونے کی تاریخ پرنٹ نہ ہو جائے۔
■ ٹیسٹ کو استعمال ہونے تک سیل بند پاؤچ میں ہی رہنا چاہیے۔
■ منجمد نہ کریں۔
■ اس کٹ کے اجزاء کو آلودگی سے بچانے کے لیے احتیاط برتی جائے۔اگر مائکروبیل آلودگی یا بارش کا ثبوت موجود ہو تو استعمال نہ کریں۔تقسیم کرنے والے آلات، کنٹینرز یا ری ایجنٹس کی حیاتیاتی آلودگی غلط نتائج کا باعث بن سکتی ہے۔

نمونوں کا مجموعہ اور ذخیرہ
پلاسٹک شافٹ کے ساتھ صرف ڈیکرون یا ریون ٹپڈ جراثیم سے پاک جھاڑیوں کا استعمال کریں۔کٹس بنانے والے کی طرف سے فراہم کردہ جھاڑو استعمال کرنے کی سفارش کی جاتی ہے (اس کٹ میں جھاڑو شامل نہیں ہیں، آرڈر کی معلومات کے لیے، براہ کرم مینوفیکچرر یا مقامی ڈسٹری بیوٹر سے رابطہ کریں، کیٹلاگ نمبر 207000 ہے)۔دوسرے سپلائرز کے جھاڑو کی توثیق نہیں کی گئی ہے۔روئی کے نوکوں یا لکڑی کے شافٹ کے ساتھ جھاڑو لگانے کی سفارش نہیں کی جاتی ہے۔
جراثیم سے پاک پالئیےسٹر جھاڑو کا استعمال کرتے ہوئے نمونہ حاصل کیا جاتا ہے۔نمونہ ڈیجیٹل امتحان اور/یا ٹرانس ویجینل الٹراساؤنڈ کرنے سے پہلے جمع کیا جانا چاہیے۔اس بات کا خیال رکھیں کہ نمونہ لینے سے پہلے کسی چیز کو جھاڑو سے نہ چھوئے۔احتیاط سے جھاڑو کی نوک کو اندام نہانی میں پوسٹرئیر فارنکس کی طرف ڈالیں جب تک کہ مزاحمت پوری نہ ہوجائے۔متبادل طور پر جراثیم سے پاک نمونے کی جانچ کے دوران پوسٹرئیر فارنکس سے نمونہ لیا جا سکتا ہے۔جھاڑو کو اندام نہانی میں 10-15 سیکنڈ کے لیے چھوڑ دینا چاہیے تاکہ یہ اندام نہانی کی رطوبت کو جذب کر سکے۔جھاڑو کو احتیاط سے باہر نکالیں!
■ جھاڑو نکالنے والی ٹیوب میں ڈالیں، اگر ٹیسٹ فوری طور پر چلایا جائے۔اگر فوری جانچ ممکن نہ ہو تو، مریض کے نمونوں کو اسٹوریج یا ٹرانسپورٹ کے لیے خشک ٹرانسپورٹ ٹیوب میں رکھنا چاہیے۔جھاڑیوں کو کمرے کے درجہ حرارت (15-30 ° C) پر 24 گھنٹے یا 4 ° C پر 1 ہفتہ یا -20 ° C پر 6 ماہ سے زیادہ نہیں رکھا جا سکتا ہے۔جانچ سے پہلے تمام نمونوں کو کمرے کے درجہ حرارت 15-30 ° C تک پہنچنے کی اجازت ہونی چاہیے۔

طریقہ کار
استعمال سے پہلے ٹیسٹ، نمونے، بفر اور/یا کنٹرول کو کمرے کے درجہ حرارت (15-30°C) پر لائیں۔
■ ورک سٹیشن کے متعین علاقے میں ایک صاف نکالنے والی ٹیوب رکھیں۔نکالنے والی ٹیوب میں 1 ملی لیٹر ایکسٹریکشن بفر شامل کریں۔
■ نمونہ جھاڑو کو ٹیوب میں ڈالیں۔جھاڑو کو ٹیوب کے اطراف میں کم از کم دس بار (ڈوبنے کے دوران) زور سے گھما کر حل کو بھرپور طریقے سے مکس کریں۔بہترین نتائج اس وقت حاصل ہوتے ہیں جب نمونہ کو حل میں بھرپور طریقے سے ملایا جائے۔
■ جب جھاڑو ہٹایا جائے تو لچکدار نکالنے والی ٹیوب کے سائیڈ کو چٹکی لگا کر جھاڑو سے زیادہ سے زیادہ مائع نچوڑیں۔کم از کم 1/2 نمونہ بفر محلول ٹیوب میں رہنا چاہیے تاکہ مناسب کیپلیری منتقلی ہو سکے۔ٹوپی کو نکالی ہوئی ٹیوب پر رکھیں۔
جھاڑو کو ایک مناسب حیاتیاتی خطرناک فضلہ کنٹینر میں پھینک دیں۔
■ نکالے گئے نمونے ٹیسٹ کے نتائج کو متاثر کیے بغیر کمرے کے درجہ حرارت پر 60 منٹ تک برقرار رہ سکتے ہیں۔
■ ٹیسٹ کو اس کے مہر بند تیلی سے ہٹائیں، اور اسے صاف، سطحی سطح پر رکھیں۔آلہ پر مریض یا کنٹرول کی شناخت کے ساتھ لیبل لگائیں۔بہترین نتیجہ حاصل کرنے کے لیے، پرکھ ایک گھنٹے کے اندر انجام دی جانی چاہیے۔
ایکسٹریکشن ٹیوب سے نکالے گئے نمونے کے 3 قطرے (تقریباً 100 µl) ٹیسٹ کیسٹ پر نمونے کے کنویں میں شامل کریں۔
نمونے کے کنویں (S) میں ہوا کے بلبلوں کو پھنسانے سے گریز کریں، اور آبزرویشن ونڈو میں کوئی محلول نہ ڈالیں۔
جیسے ہی ٹیسٹ کام کرنا شروع کرتا ہے، آپ کو جھلی کے پار رنگ کی حرکت نظر آئے گی۔
■ رنگین بینڈ کے ظاہر ہونے کا انتظار کریں۔نتیجہ 5 منٹ پر پڑھنا چاہئے۔5 منٹ کے بعد نتیجہ کی تشریح نہ کریں۔
استعمال شدہ ٹیسٹ ٹیوبوں اور ٹیسٹ کیسٹوں کو مناسب حیاتیاتی نقصان دہ فضلہ کنٹینر میں چھوڑ دیں۔
نتائج کی تشریح